牛结核病检测的标准方法 Bovigam干扰素ELISA

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荷兰赛迪/测迪 cedi diagnostics公司 bovigam 牛结核分枝杆菌γ-干扰素elisa检测试剂盒

 

牛结核病的体外诊断试剂盒，兽医诊断实验室使用 

一、简介 

牛结核病是由牛结核分枝杆菌感染引起的一种疾病，均有发生，在奶牛业中具有非常重要的地位。在一些国家，某些奶牛群的总体发病率接近60-70％。

 

二、描述 

bovigam tm 是一种牛结核病的体外快速诊断试剂盒，其原理基于血液 t 淋巴细胞对牛结核分枝杆菌 ppd的细胞免疫反应。 

结核菌素ppd抗原递呈到全血组织培养物中的淋巴细胞后，感染牛结核分枝杆菌的细胞就能产生ifn-γ，并通过基于单克隆抗体的夹心elisa检测到。未感染牛结核分枝杆菌的淋巴细胞不会产生ifn-γ，因此，γ-干扰素的检测与牛结核分枝杆菌感染相关。 

bovigamtm在牛结核菌素皮肤试验后使用。在皮肤试验检测出阴阳性结果后3-30天，可用γ-干扰素试验来确诊。

 

三、现场研究 

用澳大利亚、美国、爱尔兰、新西兰、意大利和西班牙的13 000头牛进行田间试验，结果表明bovigamtm在诊断牛结核病时更敏感，甚至能检出早期感染牛。 

在usda/ars/国家动物疾病中心的家畜细菌病研究中心(美国爱荷华州ames)，用20头对灭活牛结核分枝杆菌敏感的hereford食用牛进行了实验室对照研究。比较了bovigam tm对美国ppd和辉瑞澳大利亚ppd的反应，表明不管用美国的ppd还是用澳大利亚的ppd刺激，所有牛都表现为阳性。另外，新西兰的研究表明，试剂盒的特异性不受皮肤试验的影响，在尾根皱襞试验（cft）后3-30天使用时，本试剂盒比颈部皮肤试验（cct）更加敏感。

 

四、试剂盒组成 

试剂盒储存于2-8℃。除酶标结合物外，所有试剂在使用前恢复至室温(22° ± 5°c)。用完后立即放回2-8℃。

 

牛结核(bovine tuberculosis)是由结核分枝杆菌(mycobacteriumtuberculosis)引起的一种重要的人畜共患病，威胁畜牧业的发展和人类的健康。目前，结核分枝杆菌的检测方法主要是针对细胞免疫的结核菌素皮内变态反应检测，但该方法的敏感性和特异性均较低.

1989年wood等建立了一种简单的体外检测方法，该方法检测经结核菌素(purified protein derivative，ppd)刺激16-24h培养的全血释放的干扰素(ifn-γ)，当ppd被递呈至全血中的淋巴细胞后，感染牛分枝杆菌的细胞产生ifn-γ，未感染的细胞则不产生ifn-γ干扰素。因此，ifn-γ的检测与牛结核的感染相关。以牛ppd和禽ppd分别刺激全血，可鉴别牛分枝杆菌和副结核或禽分枝杆菌，降低了假阳性率，敏感性和特异性均达到95 %以上。该方法已被澳大利亚新西兰和欧美等国家确认为正式试验标准。